Koomesh journal
كومش
Koomesh
Medical Sciences
http://koomeshjournal.semums.ac.ir
47
journal47
16087046
10.52547/koomesh
fa
jalali
1394
3
1
gregorian
2015
5
1
16
4
online
1
fulltext
en
جداسازی و شناسایی هویت مزانشیمی و ستیغ عصبی سلولهای بنیادی مشتق از پالپ دندان
Isolation and identification of mesenchymal and neural crest characteristics of dental pulp derived stem cells
عمومى
General
پژوهشي
Research
سابقه و هدف: امروزه سلولهای بنیادی مزانشیمی به عنوان منبع بینظیر سلولهای بنیادی بزرگسالان در نظر گرفته میشوند که با کمترین مسائل اخلاقی در دسترس میباشد. این سلولها جهت بررسی بیولوژی سلولهای بنیادی، روند تمایز آنها به دیگر سلولها، مهندسی بافت، پزشکی ترمیمی و درمانهای نوین سرطان مورد استفاده میباشد. هدف از تحقیق حاضر جداسازی سلولهای بنیادی پالپ دندان و تایید ویژگیهای مزانشیمی آن به روشهای معمول میباشد. همچنین بیان پروفایل ژنی مربوط به سلولهای ستیغ عصبی در آنها بررسی میگردد. مواد و روش ها: پس از تهیه دندانها، اتاقک پالپ نمایان و بافت پالپ بهوسیله آنزیم کلاژناز تیپ چهار، هضم گردید. سپس، سلولهای جداشده از پالپ دندان در محیط αMEM ، حاوی 15% سرم جنین گاوی مخلوط شد و در دمای C ˚ 37، رطوبت 95% و CO2 5% کشت داده شدند. قدرت تمایز سلولهای بنیادی پالپ در محیطهای تمایزی استخوانی و چربی مورد ارزیابی قرار گرفت. درصد بیان نشانگرهای CD90 و CD45 به روش فلوسایتومتری بررسی شد. همچنین، بیان ژنهای p75ngfr ، slug و sox10 به روش RT-PCR مورد بررسی قرار گرفت. یافته ها: سلولهای بنیادی مشتق از پالپ دندان قابلیت اتصال خوبی داشتند و پتانسیل تکثیری بالای از خود نشان دادند. رنگآمیزی Alizarin Red و Oil red نشان داد که این سلولها در شرایط مساعد، میتوانند به ترتیب تمایز استئوژنیک و آدیپوژنیک داشته باشند. سلولهای جداسازی شده از پالپ دندان با درصد بالا نشانگر CD90 را بیان میکردند؛ در حالی که درصد بیان CD45 ،که نشانگر سلولهای هماتوپویتیک میباشد، در این سلولها ناچیز بود. همچنین، نتایج RT-PCR حاکی از بیان ژنهایی همچون p75ngfr ، slug و sox10 در سلولهای بنیادی مزانشیمی پالپ دندان بود. نتیجه گیری: سلولهای جداسازی شده از پالپ دندان، ویژگیهای سلولهای بنیادی مزانشیمی را دارا هستند و حداقل جمعیتی از سلولهای حاصل؛ منشا و ماهیت ستیغ عصبی دارند.
Introduction: Mesenchymal stem cells (MSC) are considered as a unique source of adult stem cells which are usually accessible with minimum ethical concerns. MSCs can be used in stem cell biology , different to other cells, tissue engineering, regenerative medicine and future of cancer treatment researches. The aim of the present study was to isolate dental pulp derived stem cells (DPSCs) , characterizing them with common techniques and determining neural crest gene s expression profile. Materials and Methods: After collecting the teeth , the pulp chamber exposed and the pulp tissue digested with collagenase IV. Dental pulp derived cells were resuspended and incubated in alpha modified minimum essential medium eagle ( αMEM ) supplemented with 15 % fetal bovine serum at 37°C temperature, 95% humidity and 5% CO2 . The osteogenic and adipogenic differentiation potentials for dental pulp derived cells were assessed in appropriate conditions. Flow-cytometry analyses were utilized to evaluate the percentage of CD90 and CD45 positive markers within isolated cells . The expression of p75ngfr, slug and sox10 genes was measured via RT-PCR. Results: Dental pulp derived cells were appropriately attached to the culture vessels and showed high proliferation rate on culture medium . Cells could also differentiate to osteogenic and adipose cells displayed by Alizarin red and Oil red staining . Higher percentage of pulp derived cells were CD90 positive , while the percentage of CD45 expression, as a marker of hematopoietic cells, was negligible . Furthermore , the RT-PCR also revealed the expression of p75ngfr, slug and sox10 in the MSCs isolated from the dental pulps. Conclusion: Dental pulp derived cell have the mesenchymal stem cells characteristics and at least a portion of them have neural crest origin and identity
سلولهای بنیادی مزانشیمی, پالپ دندان, تمایز سلولی, ستیغ عصبی
Mesenchymal Stromal cells, Dental pulp, Cell differentiation, Neural Crest
520
526
http://koomeshjournal.semums.ac.ir/browse.php?a_code=A-10-2551-1&slc_lang=en&sid=1
nazila
niapour
نازیلا
نیاپور
4700319475328460016896
4700319475328460016896
No
zahra
tagipour
زهرا
تقی پور
4700319475328460016897
4700319475328460016897
No
hossein
salehi
حسین
صالحی
4700319475328460016898
4700319475328460016898
No
abolfazl
bagheri
ابوالفضل
باقری
4700319475328460016899
4700319475328460016899
No
anahita
rahani
اناهیتا
روحانی
4700319475328460016900
4700319475328460016900
No
mahdie
talebi
مهدیه
طالبی
4700319475328460016901
4700319475328460016901
No
nowrouz
najafzadeh
نوروز
نجف زاده
4700319475328460016902
4700319475328460016902
No
ali
niapour
علی
نیاپور
a.niapour@arums.ac.ir
4700319475328460016903
4700319475328460016903
Yes