|
مطالعه و بررسی اثرات مهار ژن‌هایackA ، pta و poxB به وسیله‌ی RNA ی آنتی‌سنس روی ترشح استات و بیان اینترفرون بتای نوترکیب در باکتری اشریشیا‌کلای
|
محمد حسین مروت    |
|
|
|
چکیده: (2918 مشاهده) |
| هدف: اشریشیا‌کلای یکی از رایج‌ترین سیستم باکتریایی برای تولید پروتئین‌های نوترکیب دارویی محسوب می‌شود. تولید بیش از حد اسید استیک (استات) به عنوان یک محصول ناخواسته‌ی جانبی، مانعی بر سر راه استفاده از ای. کلای به شمار می‌رود. در این پژوهش، برای حل مشکل ترشح اضافی استات، از یک روش مهندسی متابولیک مبتنی بر فناوری آنتی‌سنس استفاده شد.
مواد و روش‌ها: یک پلاسمید نوترکیب حاوی توالی کد‌کننده اینترفرون نوترکیب بتای انسانی و سه قطعه آنتی‌سنس بر علیه ژن‌های استات کیناز، فسفوترانس استیلاز و پیروات اکسیداز طراحی شد. اثرات ایجاد شده توسط آن بر فیزیولوژی سلولی و بیان اینترفرون بتا و غلظت استات در باکتری ای. کلای بررسی شد.
یافته‌ها: غلظت mRNA ژن‌های هدف‌گیری شده در سویه‌ی حاوی قطعات آنتی‌سنس در مقایسه با سویه‌ی کنترل کم‌تر شده بود. با استفاده از فناوری آنتی‌سنس، غلظت استات در محیط کشت کاهش یافته بود. بیان قطعات RNA آنتی‌سنس تاثیر نامطلوبی بر روند رشد سلولی ایجاد نکرد. به علاوه، بیشینه‌ی مقدار اینترفرون بتای نوترکیب در سویه‌ی کنترل شده با فناوری آنتی‌سنس در مقایسه با سویه‌ی کنترل بیش‌تر شده بود.
نتیجه‌گیری: استفاده از فناوری آنتی‌سنس به منظور مهندسی متابولیک چرخه‌ی استات در ای. کلای موفقیت‌آمیز بود. فناوری توصیف شده در این پژوهش، قابلیت به کار گرفته شدن برای تولید سایر پروتئین نوترکیب دارویی، را دارا می‌باشد.
|
|
| واژه‌های کلیدی: ای. کلای، پروتئین نوترکیب، استات، فناوری آنتی‌سنس، اینترفرون بتا |
|
|
متن کامل [PDF 1172 kb]
(646 دریافت)
|
نوع مطالعه: پژوهشي |
موضوع مقاله:
عمومى
دریافت: 1398/4/14 | پذیرش: 1398/9/3 | انتشار: 1399/2/24
|
|
|
|
|
|
|
| ارسال پیام به نویسنده مسئول |
|
|
|
| ارسال نظر درباره این مقاله |
|
|
|
