|
ارزیابی روش تشخیصی Real Time PCR مبتنی بر آنالیز منحنی ذوب جهت تشخیص ایزوله‌های بالینی استافیلوکوک اورئوس و ژن عامل مقاومت به متی‌سیلین
|
نرگس حیدری   ، محمد یوسف علیخانی ، فرید عزیزی جلیلیان ، حامد طهماسبی ، محمد رضا عربستانی |
|
|
|
چکیده: (5332 مشاهده) |
| هدف: تشخیص سریع وبه موقع استافیلوکوک اورئوس می‌تواند نقش قابل توجهی در درمان عفونت‌های استافیلوکوکی داشته باشد. با طراحی روش‌های دقیق که دارای حساسیت و اختصاصیت قابل قبولی هستند، می‌توان شناسایی گونه و حتی سویه‌های مقاوم به آنتی‌بیوتیک را انجام داد. هدف از این مطالعه ارزیابی روش تشخیصی Real Time PCR مبتنی بر آنالیز منحنی ذوب جهت تشخیص ایزوله‌های بالینی استافیلوکوک اورئوس و ژن عامل مقاومت به متی‌سیلین می‌باشد.
مواد و روش‌ها: در این مطالعه تجربی از ایزوله‌های بالینی استافیلوکوک ذخیره شده در بانک میکروب‌شناسی دانشگاه علوم پزشکی همدان استفاده شد. طراحی پرایمر با انتخاب سایت‌های هدف و ژن ITS برای استافیلوکوک اورئوس و ژن mecA برای سویه‌های مقاوم به متی‌سیلین صورت گرفت. جهت تعیین اختصاصیت و حساسیت آنالیتیک پرایمرهای طراحی شده از آزمون Real time PCR و روش آنالیز منحنی ذوب DNA سویه‌های مورد مطالعه استفاده شد.
یافته‌ها: اختصاصیت آنالیتیک پرایمرهای طراحی شده با استفاده از آنالیز منحنی ذوب DNA جهت شناسایی استافیلوکوک اورئوس در 79/83 درجه سانتی‌گراد و استافیلوکک اورئوس مقاوم به متی‌سیلین در 6/76 درجه سانتی‌گراد به‌دست آمد. حساسیت آنالیتیکی پرایمرهای طراحی شده نیز بر اساس نمودارهای حدآستانه و رقت‌های تعیین شده، برای ژن ITS توانایی شناسایی بیش از 15 CFU باکتری و برای ژن mecA توانایی شناسایی بیش از 25 CFU باکتری را نشان داد.
نتیجه‌گیری: طراحی پرایمرهای مناسب و به‌کارگیری تکنیک‌های مولکولی حساس، می‌تواند دو عامل تعیین‌کننده در طراحی روش‌های سریع و دقیق جهت شناسایی باکتری‌های مهاجمی مانند استافیلوکوک اورئوس باشد. |
|
| واژه‌های کلیدی: استافیلوکک اورئوس، مقاومت به متی‌سیلین، Real time PCR، مقاومت داروئی |
|
|
متن کامل [PDF 896 kb]
(2900 دریافت)
|
نوع مطالعه: پژوهشي |
موضوع مقاله:
عمومى
دریافت: 1395/11/17 | پذیرش: 1396/5/2 | انتشار: 1396/7/11
|
|
|
|
|
|
