بیان ژن زیر واحد B توکسین حساس به حرارت انتروتوکسیژنیک اشریشیاکلی (Enterotoxigenic Escherichia coli) در سالمونلا تیفی موریوم G30: ایجاد پاسخ ایمنی با استفاده از یک مدل زنده خوراکی
|
محمدرضا اکبری عیدگاهی ، بهمن ترابی ، ولادیمیر ریچنسکی |
|
|
چکیده: (16984 مشاهده) |
سابقه و هدف: استفاده از سویه های تضعیف شده سالمونلا، نظیر سالمونلا تیفی موریوم G30، به منظور طراحی و ساخت واکسن های زنده خوراکی بر پایه سالمونلا (Salmonella-based live oral vaccine) بسیار مورد توجه قرار دارد. این سویه ها برای بیان ژن های ایمنی بخش سایر مکیروارگانیسم ها در داخل بدن و تحریک پاسخ ایمنی به کار می روند. زیر واحد (LT-B) توکسین حساس به حرارت انتروتوکسیژنیک اشریشیاکلی (ETEC ،Enterotoxigenic Escherichia coli)، یک ایمونوژن قوی بوده و به عنوان کاندید برای ساخت واکسن علیه اسهال های ناشی از این میکروارگانیسم است. هدف این مطالعه بیان ژن کد کننده LT-B تحت دو پرموتر/رپرسور با قدرت متفاوت در سالمونلا تیفی موریوم G30 و ارزیابی آنها در ایجاد پاسخ آنتی بادی است. مواد و روش ها: ژن کند کننده LT-B، که تحت پروموترهای trc و lac کلون شده بود به سالمونلا تیفی موریوم G30 ترانسفورم گردید و دو سویه جدید G30TLTB و G30ULTB بدست آمد. LT-B نوترکیب تولید شده توسط این دو سویه از نظر ساختمانی و ایمونولوژیک مطالعه شده و همچنین توانایی این دو سویه در ایجاد پاسخ آنتی بادی در موش های C57/BL6 مورد ارزیابی قرار گرفت. یافته ها: LT-B نوترکیب تولید شده در هر دو سویه سالمونلا، از نظر تشکیل فرم پنتامر، وزن مولکولی و حرکت الکترفورزی، توانایی اتصال به رسپتور GM1 و حفظ شاخص های آنتی ژنیک بر علیه آنتی بادی های منوکلونال D15-9 و LT-39 مشابه فرم طبیعی LT-B بود. هر دو سویه نیز وقتی به عنوان واکسن خوراکی زنده به سوش های C57/BL6 خورانده شد قادر به ایجاد پاسخ بالا رونده آنتی بادی بودند. نتیجه گیری: سالمونلا تیفی موریوم G30 قادر بود ژن کد کننده LT-B را در In vivo در عدم حضور القا کننده های شیمیایی نظیر IPTG، بیان و پاسخ آنتی بادی علیه آن ایجاد کند. بهینه سازی شرایط بیان ژن می تواند گامی در جهت ساخت یک واکسن زنده خوراکی علیه اسهال ناشی از انتروتوکسیژنیک E.coli باشد. |
|
واژههای کلیدی: سالمونلا تیفی موریوم، انتروتوکسیژنیک اشریشیاکلی، زیر واحد B توکسین حساس به حرارت اشریشیاکلی (LT-B)، واکسن علیه انتروتوکسیژنیک اشریشیاکلی |
|
متن کامل [PDF 1373 kb]
(2311 دریافت)
|
نوع مطالعه: پژوهشي |
موضوع مقاله:
عمومى دریافت: 1387/11/13 | انتشار: 1378/11/26
|
|
|
|