|
بیان آنتی‌ژن نوترکیب گیرنده فاکتور رشد اپیدرمال انسانی (HER-2) به عنوان یک نشانگر سرطان سینه در سیستم مخمری و بررسی خصوصیات آن
|
سعیده فرومدی   ، معصومه رجبی بذل ، حسین حسینی ، شیرین رجبی ، سولماز شهیدی ، اعظم دارایی ، اتابک طوفانی میلانی |
|
|
|
چکیده: (4923 مشاهده) |
| سابقه و هدف: بیش از دو دهه است که استفاده از داروهای ایمونوتراپی در درمان سرطان رواج پیدا کرده است. در این روش آنتی‌بادی منوکلونال علیه آنتی‌ژن سرطانی استفاده می‌شود که با قرار گرفتن روی آنتی‌ژن مانع عملکرد آن می‌گردد. نشان داده شده است که بیان بیش از حد فاکتور رشد اپیدرمال انسانی (HER-2) به عنوان یک فاکتور پیش‌آگهی‌دهنده و پیش‌بینی‌کننده مهم در سرطان سینه، با افزایش خطر عود و مرگ ناشی از سرطان سینه همراه است. هدف این پروژه بیان آنتی‌ژن HER-2 با کیفیت و عملکرد بالا در سیستم بیانی یوکاریوتی مخمر و استفاده از آن در مطالعات بعدی می‌باشد.
مواد و روش‌ها: بیان بخشی از توالی گیرنده خارج سلولی HER-2 در وکتور pPICZα در میزبان پیکیاپاستوریس سویه X33 در محیط BMGY انجام شد. بیان پروتئین توسط SDS-PAGE و صحت پروتئین بیان شده با تکنیک الایزا بررسی گردید.
یافته‌ها: بررسی بیان پروتئین Her-2 بر روی ژل SDS-PAGE 7% به همراه مارکر پروتئینی 186 کیلودالتون نشان داد که بیان پروتئین مورد نظر پس از القا با IPTG افزایش یافته است. جهت ارزیابی واکنش آنتی ژن Her-2 بیان شده با آنتی بادی منوکلونال هرسپتین از تست الایزا استفاده شد و نتایج نشان داد که آنتی ژن به دست آمده میل ترکیبی بالایی نسبت به آنتی بادی هرسپتین دارد.
نتیجه‌گیری: در این مطالعه آنتی ژن Her-2 در سیستم بیانی مخمر تولید شد. با توجه به مزایای سیستم بیانی مخمر از جمله بیان ترشحی پروتئین، تا خوردگی مناسب پروتئین، گلیکوزیلاسیون و فعالیت پروتئین حاصل شده در بازه گسترده pH، آنتی ژن Her-2 بیان شده در مخمر از کیفیت و عملکرد مطلوبی برخوردار بوده و در مطالعات آتی مورد استفاده قرار خواهد گرفت |
|
| واژه‌های کلیدی: سرطان سینه، HER-2، پیکیاپاستوریس |
|
|
متن کامل [PDF 776 kb]
(1117 دریافت)
|
نوع مطالعه: كاربردي |
موضوع مقاله:
عمومى
دریافت: 1394/9/30 | پذیرش: 1395/6/6 | انتشار: 1395/6/28
|
|
|
|
|
|
|
| ارسال پیام به نویسنده مسئول |
|
|
|
| ارسال نظر درباره این مقاله |
|
|
|
