|
جداسازی، همسانه‌سازی و بررسی ویژگی‌های ژن انتقال‌دهنده هگزوز 7 (HXT7) از مخمر ساکارومایسس سرویزیه سویه ایرانی
|
سولماز عزیزی   ، علیرضا تاری نژاد |
|
|
|
چکیده: (6959 مشاهده) |
| سابقه و هدف: مخمر ساکارومایسس
سروزیه از جمله مهم‌ترین میکروارگانیسم‌ها برای تولید اتانول است و از طریق تخمیر
الکلی باعث تولید اتانول می‌شود. این به دلیل کارایی بالای این موجود در جذب
و تخمیر قندهای هگزوز می‌باشد. مخمر ساکارومایسس سرویزیه دارای 20 ژن کدکننده‌ی
پروتئین‌های انتقال‌دهنده‌ی هگزوز می‌باشد که شامل HXT1-HXT17، GAL2، SNF3 و RGT2 است. از میان
این خانواده ژنی، هفت ژن HXT1-HXT7 نقش مهمی در فرآیند تولید الکل دارند.
محققین ثابت کردند که با افزایش میزان بیان این ژن‌ها سرعت تخمیر الکلی افزایش و
در نتیجه‌ی آن میزان تولید اتانول افزایش می‌یابد هدف این مطالعه شناسایی و
جداسازی ژن HXT7
از ژنوم مخمر ساکارومایسس سرویزیه از طریق PCR و همسانه‌سازی
آن در وکتور دارای پروموتور بیانی مناسب به منظور پایه‌ای برای طراحی پلاسمید
بیانی و نهایتاً مخمر نوترکیب بود. مواد و روش‌ها: در این تحقیق جداسازی ژن HXT7 با پرایمرهای اختصاصی ژن از
طریق PCRصورت گرفت و با انجام لیگاسیون قطعه‌ی تکثیر یافته به
پلاسمید pGEM-T کلون شد و به باکتری E. coli ترانسفرم گردید
و در نهایت برای تایید نهایی قطعات کلون شده در پلاسمیدهای نوترکیب به توالی‌یابی
فرستاده شدند. یافته‌ها: توالی نوکلئوتیدی چارچوب
بازخوانی این ژن به طول bp1713 بوده و یک پروتئین با 570 اسیدآمینه را
رمز می‌کند. وزن مولکولی تخمین زده شده و نقطه آیزوالکتریک پیش‌بینی شده این
پروتئین به ترتیب 725/62 کیلودالتون و 89/7 است. نتیجه‌گیری: توالی
پروتئینی به‌دست آمده شباهت زیادی با Hxt7p سویه‌های
دیگر ساکارومیسس سرویزیه موجود در NCBI دارد و
بالاترین درصد تشابه را با Hxt7p
ساکارومیسس سرویزیه سویه‌ی S288C ثبت شده
در NCBI با کد
دسترسی NP010629.3 دارد |
|
| واژه‌های کلیدی: همسانه‌سازی، ساکارومیسس سرویزیه، ژن HXT7، پلاسمید نوترکیب |
|
|
متن کامل [PDF 1738 kb]
(1320 دریافت)
|
نوع مطالعه: پژوهشي |
موضوع مقاله:
عمومى
دریافت: 1393/2/4 | پذیرش: 1393/8/19 | انتشار: 1393/12/27
|
|
|
|
|
|
