[صفحه اصلی ]   [Archive] [ English ]  
:: صفحه اصلي :: درباره نشريه :: آخرين شماره :: تمام شماره‌ها :: جستجو :: ثبت نام :: ارسال مقاله :: تماس با ما ::
:: جلد 6، شماره 3 - ( 2-1384 ) ::
جلد 6 شماره 3 صفحات 207-216 برگشت به فهرست نسخه ها
تولید موش ترانس‌ژنیک واجد ترانس‌ژن بتالاکتوگلبولین- کلسی‌تونین
احمدرضا نیاورانی* ، سمیه دهقانی‌زاده، محسن کریمی، سیروس زینلی
چکیده:   (11283 مشاهده)
سابقه و هدف: بیان پروتئین‌های خارجی در شیر پستانداران یکی از راه‌کارهایی است که به تدریج کاربرد وسیعی در تولید انبوه فرآورده‌های دارویی نوترکیب می‌یابد، به‌ویژه فرآورده‌هایی که دست‌خوش بیش‌ترین تغییرات پس از ترجمه‌ای می‌شوند. هدف از این تحقیق ایجاد موش‌های ترانس‌ژنیکی بود که واجد ترانس‌ژن بیان‌کننده کلسی‌تونین هیبرید در غدد شیری موش باشند. مواد و روش‌ها: در این تحقیق از یک پروموتر اختصاصی شیر به نام بتالاکتوگلبولین گوسفندی (oBLG) برای القای بیان کلسی‌تونین هیبرید نوترکیب در شیر موش استفاده شد. بر این اساس، یک سازه ژنی متشکل از 7/10 کیلوباز از ژن oBLG شامل پروموتر و ناحیه پایین دست ژن ساخته شد و توالی کدکننده کلسی‌تونین در چارچوب ترجمه اگزون پنجم oBLG قرار داده شد. سازه ژنی کلون شده پس از تخلیص روی شیب سزیم کلراید، از ناقل خود آزاد شد و به وسیله ژل آگارز تخلیص گردید و با فیلتراسیون و رقیق سازی آماده استفاده شد. آن‌گاه سازه ژنی مزبور به کمک میکرومانیپولاتور در تخمک‌های تازه بارور موش تزریق شد و سلول‌های زنده مانده از این تزریقات، به لوله رحمی موش‌هایی با آبستنی کاذب بازگردانده شدند. حاصل این انتقال زیگوت‌های تزریق شده 41 موش بود که ژنوتیپ آن‌ها با استفاده از PCR، اسلات بلات و ساترن بلات تعیین گردید. یافته‌ها: نتایج تعیین ژنوتیپ با PCR نشان داد که 9 موش از نظر وجود ترانس‌ژن مثبت هستند، در حالی که تنها 4 موش بلات مثبت داشتند. 3 موش نر و 3 موش ماده، ترانس‌ژن را به نسل بعدی، یعنی نسل اول موش‌های ترانس‌ژنیک انتقال دادند. موش‌های نسل اول به بعد نیز ترانس‌ژن را به صورت پایا و تابع قواعد مندلی به نسل دوم انتقال دادند. نتیجه‌گیری: با توجه به این که 6 موش از 9 موش مزبور توانستند ترانس‌ژن را حداقل به یکی از موش‌های نسل بعدی خویش انتقال دهند، این 6 موش را می‌توان بانی‌های (Founders) مستقل ترانس‌ژنیک و سردسته خانواده‌های ترانس‌ژنیک مزبور در نظر گرفت.
واژه‌های کلیدی: موش ترانس‌ژنیک، شیر، بتا لاکتوگلبولین، کلسی‌تونین، پروتئین نوترکیب، پروتئین ترکیبی
متن کامل [PDF 350 kb]   (2130 دریافت)    
نوع مطالعه: كاربردي | موضوع مقاله: عمومى
دریافت: ۱۳۸۷/۶/۲۰
ارسال پیام به نویسنده مسئول

ارسال نظر درباره این مقاله
نام کاربری یا پست الکترونیک شما:

CAPTCHA code


XML   English Abstract   Print


Download citation:
BibTeX | RIS | EndNote | Medlars | ProCite | Reference Manager | RefWorks
Send citation to:

Niavarani A, Dehghanizadeh S, Karimi M, Zeinali S. Development of transgenic mice harboring ovine beta lactoglobulin-calcitonin transgene. koomesh. 2005; 6 (3) :207-216
URL: http://koomeshjournal.semums.ac.ir/article-1-141-fa.html

نیاورانی احمدرضا، دهقانی‌زاده سمیه، کریمی محسن، زینلی سیروس. تولید موش ترانس‌ژنیک واجد ترانس‌ژن بتالاکتوگلبولین- کلسی‌تونین. كومش. 1384; 6 (3) :207-216

URL: http://koomeshjournal.semums.ac.ir/article-1-141-fa.html



جلد 6، شماره 3 - ( 2-1384 ) برگشت به فهرست نسخه ها
کومش Koomesh
Persian site map - English site map - Created in 0.05 seconds with 31 queries by YEKTAWEB 3731