[صفحه اصلی ]   [Archive] [ English ]  
:: صفحه اصلي :: درباره نشريه :: آخرين شماره :: تمام شماره‌ها :: جستجو :: ثبت نام :: ارسال مقاله :: تماس با ما ::
:: جلد 6، شماره 3 - ( 2-1384 ) ::
جلد 6 شماره 3 صفحات 201-206 برگشت به فهرست نسخه ها
کلون‌کردن ژن آنتی‌ژن ایمنی‌بخشBacillus anthracis در Bacillus subtilis
مجید مقبلی* ، فریدون ملک‌زاده، سیروس زینلی، کاظم پریور، مهناز مظاهری‌اسدی
چکیده:   (11691 مشاهده)
سابقه و هدف: آنتی‌ژن ایمنی‌بخش(PA) (Protective antigen) Bacillus anthracis به‌عنوان واکسن سیاه زخم مورد استفاده قرار می‌گیرد. کلون و بیان ژن PA در سویه‌های مختلف گزارش شده است که بیش‌ترین بیان، در B. subtilis تا μg/ml 160 بوده است. هدف از این تحقیق کلون کردن ژن PA در ناقل بیان‌کننده pWB980 و انتقال آن به B. subtilis سویه WB600 می‌باشد. مواد و روش‌ها: در این مطالعه پلاسمید pXO1 از B. anthracis سویه Stern با روش قلیا جدا و ترادف بازی kb 4/2 ژن با استفاده از PCR تکثیر گردید. قطعه تکثیر یافته به‌طور مستقیم بر روی ناقل pTZ57R کلون و با استفاده از روش CaCl2 به E.coli سویه DH5α انتقال یافت. سپس ژن با آنزیم‌های SalI و KpnIاز روی T-Vector جدا گردید. واکنش اتصال بین قطعه ژن خالص شده PA و ناقل pWB980 گذاشته شد و سپس با روش Electroporation در V 1000 به B. subtilis منتقل شد. یافته‌ها: در این تحقیق توانستیم ژن PA را به‌وسیله PCR از B. anthracis سویه Stern جدا و ابتدا در پلاسمید pTZ57R کلون کرده و وجود ژن با تجزیه و تحلیل آنزیمی، واکنش PCR و تعیین ترادف بازی (Sequencing) تأیید گردید. سپس ژن بر روی ناقل بیان‌کننده pWB980 و در B. subtilis کلون و وجود ژن در دو کلنی مقاوم به کانامایسین AMN1 و AMN3 با استفاده از تجزیه و تحلیل آنزیمی و واکنش PCR تأیید گردید. نتیجه‌گیری: در این تحقیق با تغییر در روش‌های مورد استفاده و استفاده از ناقل بیان‌کننده pWB980 توانستیم ژن PA را درB. subtilis کلون کنیم. این ژن برای اولین بار در ایران جدا و کلون شده است؛ هم‌چنین این تحقیق اولین کار کلون کردن ژن در میزبان B. subtilis در ایران می‌باشد.
واژه‌های کلیدی: Bacillus subtilis، Bacillus anthracis، کلون کردن، آنتی‌ژن ایمنی‌بخش، pWB980، سیاه زخم
متن کامل [PDF 366 kb]   (2440 دریافت)    
نوع مطالعه: كاربردي | موضوع مقاله: عمومى
دریافت: ۱۳۸۷/۶/۲۰
ارسال پیام به نویسنده مسئول

ارسال نظر درباره این مقاله
نام کاربری یا پست الکترونیک شما:

CAPTCHA code


XML   English Abstract   Print


Download citation:
BibTeX | RIS | EndNote | Medlars | ProCite | Reference Manager | RefWorks
Send citation to:

Moghbeli M, Malekzadeh F, Zeinali S, Parivar K, Mazaheri Assadi M. Cloning of protective antigen gene from Bacillus anthracis into Bacillus subtilis. koomesh. 2005; 6 (3) :201-206
URL: http://koomeshjournal.semums.ac.ir/article-1-140-fa.html

مقبلی مجید، ملک‌زاده فریدون، زینلی سیروس، پریور کاظم، مظاهری‌اسدی مهناز. کلون‌کردن ژن آنتی‌ژن ایمنی‌بخشBacillus anthracis در Bacillus subtilis. كومش. 1384; 6 (3) :201-206

URL: http://koomeshjournal.semums.ac.ir/article-1-140-fa.html



جلد 6، شماره 3 - ( 2-1384 ) برگشت به فهرست نسخه ها
کومش Koomesh
Persian site map - English site map - Created in 0.05 seconds with 31 queries by YEKTAWEB 3781