اکثر مکاتبات کومش از طریق ایمیل سایت می باشد.
لطفا Spam ایمیل خود را نیز چک نمایید.
   [صفحه اصلی ]   [Archive] [ English ]  
:: صفحه اصلي :: درباره نشريه :: آخرين شماره :: تمام شماره‌ها :: جستجو :: ثبت نام :: ارسال مقاله :: تماس با ما ::
:: جلد 21، شماره 4 - ( پائیز 1398 1398 ) ::
جلد 21 شماره 4 صفحات 743-750 برگشت به فهرست نسخه ها
ساخت سویه بیانی پیکیا پاستوریس مولد قطعه‌ی تک‌زنجیره‌ای ناحیه‌ی ‌متغیر آنتی‌بادی علیه ناحیه خارج سلولی EpCAM
فاطمه محمد قلیزاد، عطیه هاشمی
چکیده:   (206 مشاهده)
هدف: مولکول چسباننده سلولهای اپیتلیال (EpCAM) در سطح سلول‌های توموری اپیتلیال به طور فزاینده‌ای بیان می‌شود. بنابراین EpCAM یک آنتی‌ژن با ارزش در درمان هدفمند محسوب می‌شود. استفاده از آنتی‌بادی‌های منوکلونال رویکردی جذاب در درمان هدفمند سرطان است. محدودیت‌های آنتی‌بادی‌های منوکلونال نظیر اندازه‌ی بزرگ منجر به توسعه قطعات تک‌زنجیره‌ای ناحیه متغیر آنتی‌بادی (scfv) شد. پیکیا پاستوریس به علت انجام فرایندهای پس از ترجمه و قیمت ارزان به عنوان میزبانی مناسب در بیان پروتئین‌های نوترکیب در مقیاس بالا مورد توجه است. در این مطالعه، پیکیا پاستوریس بیان‌کننده scfv علیه قسمت خارج سلولی (EpEX) EpCAM  ساخته شد.
مواد و روشها: ژن بهینه شده‌ی کدونی مولد پروتئین anti-EpEX-scfv در سایت‌های آنزیمی XhoI و XbaI وکتور pPICZαB وارد شد. صحت سازه نوترکیب به کمک توالی‌یابی و آنالیز آنزیمی تأیید شد. سازه نوترکیب با کمک الکتروپوراسیون در سویه GS115 وارد شد. کلون‌های مثبت با کمک PCR و با به‌کارگیری سه جفت پرایمر ارزیابی شدند.
یافتهها: صحت سازه نوترکیب با استفاده از آنزیم‌های HindIII وBamHI  (باندهای 2788 و 1537 جفت باز) هم‌چنین XhoI و XbaI (باندهای 3506 و 819 جفت باز) تأیید شد. کلون‌های نوترکیب با کمک PCR با مشاهده دو باند (2200 و 1321 جفت باز) زمانی‌که دو پرایمر AOX استفاده شد، هم‌چنین یک باند (968 جفت باز) زمانی‌که پرایمر AOX و پرایمر اختصاصی ژن استفاده شد، تأیید شد. هنگامی‌که دو پرایمر اختصاصی ژن به‌کار گرفته شد، یک باند (751 جفت باز) مشاهده شد.
نتیجهگیری: این یافته‌ها ساخت سویه مهندسی شده را تأیید می‌کند. پروتئین anti-EpEX-scfv می‌تواند انتخابی مناسب در زمینه‌ی ایمنی‌درمانی سرطان باشد.
 
واژه‌های کلیدی: پیکیا پاستوریس، anti-EpEX-scfv، آنتی‌بادی منوکلونال، EpCAM، ایمنی درمانی سرطان
متن کامل [PDF 2558 kb]   (33 دریافت)    
نوع مطالعه: پژوهشي | موضوع مقاله: عمومى
دریافت: ۱۳۹۷/۶/۱۱ | پذیرش: ۱۳۹۷/۱۲/۱۳ | انتشار: ۱۳۹۸/۸/۷
ارسال پیام به نویسنده مسئول

ارسال نظر درباره این مقاله
نام کاربری یا پست الکترونیک شما:

CAPTCHA


XML   English Abstract   Print


Download citation:
BibTeX | RIS | EndNote | Medlars | ProCite | Reference Manager | RefWorks
Send citation to:

Mohammadgholizad F, Hashemi A. Construction of recombinant Pichia pastoris expressing single-chain antibody fragment against extracellular domain of EpCAM . koomesh. 2019; 21 (4) :743-750
URL: http://koomeshjournal.semums.ac.ir/article-1-5101-fa.html

محمد قلیزاد فاطمه، هاشمی عطیه. ساخت سویه بیانی پیکیا پاستوریس مولد قطعه‌ی تک‌زنجیره‌ای ناحیه‌ی ‌متغیر آنتی‌بادی علیه ناحیه خارج سلولی EpCAM. كومش. 1398; 21 (4) :743-750

URL: http://koomeshjournal.semums.ac.ir/article-1-5101-fa.html



جلد 21، شماره 4 - ( پائیز 1398 1398 ) برگشت به فهرست نسخه ها
کومش Koomesh
Persian site map - English site map - Created in 0.06 seconds with 32 queries by YEKTAWEB 4009