[صفحه اصلی ]   [Archive] [ English ]  
:: صفحه اصلي :: درباره نشريه :: آخرين شماره :: تمام شماره‌ها :: جستجو :: ثبت نام :: ارسال مقاله :: تماس با ما ::
:: جلد 20، شماره 1 - ( زمستان 1396 ) ::
جلد 20 شماره 1 صفحات 115-121 برگشت به فهرست نسخه ها
کلونینگ و تولید فرم مونومر استرپتاویدین نوترکیب و ارزیابی اتصال آن به بیوتین
الهام دیده ورا، عبدالرحیم صادقی، حمید ابطحی*
چکیده:   (934 مشاهده)
هدف: استرپتاویدین پروتئینی هموتترامر است که تمایل اتصال بالای آن به بیوتین باعث شده در فرآیندهای بیوتکنولوژی و مطالعات سلولی کاربرد فراوانی داشته باشد. اما فرم تترامر آن در بعضی تداخل ایجاد می‌کند. بنابراین در این مطالعه با ایجاد جهش حذفی اقدام به تولید فرم مونومر استرپتاویدین گردید.
مواد و روش‌ها: ابتدا توالی نوکلئوتیدی استرپتاویدین از سایت NCBI گرفته شد و بعد از اعمال جهش در توالی ژن مورد نظر به منظور بیان در باکتری E.coli  بهینه و سنتز گردید. برای کلون کردن ژن از سویه E.coli DH5α و برای بیان ژن استرپتاویدین از سویه E.coli BL21 (DE3) pLysS استفاده شد. تخلیص پروتئین با کیت
 
Ni-NTA انجام شد و توسط HABA dye تمایل اتصال استرپتاویدین به بیوتین مورد سنجش قرار گرفت.
یافته‌ها: فرم مونومر استرپتاویدین در میزبان بیانی E.coli BL21 (DE3) pLysS تولید و تخلیص گردید. استرپتاویدین مونومر نوترکیب دارای تمایل اتصال مناسب به بیوتین بود.
نتیجهگیری: با ایجاد جهش در توالی پپتیدی استرپتاویدین می‌توان به فرم مونومر آن دست یافت که دارای تمایل اتصال مناسب به بیوتین باشد.
واژه‌های کلیدی: استرپتاویدین، همانند سازی مولکولی، اشریشیا کلی
متن کامل [PDF 746 kb]   (140 دریافت)    
نوع مطالعه: پژوهشي | موضوع مقاله: عمومى
دریافت: ۱۳۹۵/۱۰/۲۷ | پذیرش: ۱۳۹۶/۸/۲۴ | انتشار: ۱۳۹۶/۱۰/۱۱
ارسال پیام به نویسنده مسئول

ارسال نظر درباره این مقاله
نام کاربری یا پست الکترونیک شما:

CAPTCHA code


XML   English Abstract   Print


Download citation:
BibTeX | RIS | EndNote | Medlars | ProCite | Reference Manager | RefWorks
Send citation to:

Didevara E, Sadeghi A A, Abtahi H. Cloning and production of the monomer form of recombinant streptavidin and appraisal of it`s binding affinity to biotin. koomesh. 2018; 20 (1) :115-121
URL: http://koomeshjournal.semums.ac.ir/article-1-3802-fa.html

دیده ورا الهام، صادقی عبدالرحیم، ابطحی حمید. کلونینگ و تولید فرم مونومر استرپتاویدین نوترکیب و ارزیابی اتصال آن به بیوتین. كومش. 1396; 20 (1) :115-121

URL: http://koomeshjournal.semums.ac.ir/article-1-3802-fa.html



جلد 20، شماره 1 - ( زمستان 1396 ) برگشت به فهرست نسخه ها
کومش Koomesh
Persian site map - English site map - Created in 0.05 seconds with 31 queries by YEKTAWEB 3731