اکثر مکاتبات کومش از طریق ایمیل سایت می باشد.
لطفا Spam ایمیل خود را نیز چک نمایید.
   [صفحه اصلی ]   [Archive] [ English ]  
:: صفحه اصلي :: درباره نشريه :: آخرين شماره :: تمام شماره‌ها :: جستجو :: ثبت نام :: ارسال مقاله :: تماس با ما ::
:: جلد 19، شماره 1 - ( زمستان 1395: جلد 19 شماره (1) 1395 ) ::
جلد 19 شماره 1 صفحات 183-190 برگشت به فهرست نسخه ها
طراحی و ساخت کلونینگ وکتور حاوی قطعه فیوژنی دو ژن hspX و tb 10.4 مایکوباکتریوم توبرکلوزیس
عطیه یعقوبی، احسان آریان، محمد درخشان، زهرا مشکات
چکیده:   (1883 مشاهده)

هدف: سل از مهم‌ترین بیماری‌های عفونی و از شایع‌ترین علل مرگ و میر در دنیا خصوصاً در کشورهای در حال توسعه می‌باشد که توسط مایکوباکتریوم توبرکلوزیس ایجاد می‌شود. طراحی و ساخت واکسن های جدید بر علیه مایکوباکتریوم توبرکلوزیس تنها راه موثر در پیشگیری و کنترل آن می‌باشد. هدف از این مطالعه طراحی و ساخت  کلونینگ وکتور با استفاده از فیوژن ادغام دو ژن hspX و tb10.4 مایکوباکتریوم توبرکلوزیس می‌باشد.

مواد و روشها: ابتدا قطعه tb10.4 با روش PCR تکثیر، با استفاده از آنزیم‌های محدودالاثر مناسب هضم و در  پلاسمید pcDNA3.1+ کلون شد. سپس قطعه hspX با PCR تکثیر و با آنزیم‌های محدودالاثر HindIII و BamHI هضم شد. پلاسمید نوترکیب pcDNA3.1+/tb10.4 نیز با آنزیم‌های فوق هضم و قطعه hspX در hspX در وکتور نوترکیب مذکور ساب کلون و در باکتری E.coli سویه TOP 10 ترانسفورم شد. تایید کلونی‌های نوترکیب  با کلونی-PCR، هضم آنزیمی و تعیین توالی صورت گرفت.

یافتهها: محصولات PCR و هضم آنزیمی بر روی ژل آگاروز الکتروفورز شد که وجود قطعات tb10.4 و hspX با اندازه bp 291 جفت بازو bp 435جفت باز به ترتیب مشاهده شد. نتایج تعیین توالی 100% همولوژی با توالی‌های ژن‌های hspX و tb10.4 مایکوباکتریوم توبرکلوزیس سویه مذکور H37Rv ثبت شده در بانک ژنی را نشان دادند.

نتیجهگیری: کلونینگ دو ژن hspX و tb10.4 مایکوباکتریوم توبرکلوزیس در وکتور pcDNA3.1+ به درستی انجام شد. این وکتور می‌تواند در آینده پس از تایید بیان آن در سلول‌های یوکاریوتی، به عنوان کاندید DNA واکسن DNA واکسن در القای سیستم ایمنی در مدل‌های آزمایشگاهی مورد استفاده قرار گیرند

واژه‌های کلیدی: مایکوباکتریوم توبرکلوزیس، کلونینگ، کلونینگ tb10.4، hspX، واکسن DNA
متن کامل [PDF 657 kb]   (467 دریافت)    
نوع مطالعه: پژوهشي | موضوع مقاله: عمومى
دریافت: ۱۳۹۴/۱۰/۱۷ | پذیرش: ۱۳۹۵/۶/۱۴ | انتشار: ۱۳۹۵/۱۰/۱۴
ارسال پیام به نویسنده مسئول

ارسال نظر درباره این مقاله
نام کاربری یا پست الکترونیک شما:

CAPTCHA


XML   English Abstract   Print


Download citation:
BibTeX | RIS | EndNote | Medlars | ProCite | Reference Manager | RefWorks
Send citation to:

Yaghoubi A, Aryan E, Derakhshan M, Meshkat Z. Design and construction of fusion genes hspX and tb10.4 from Mycobacterium tuberculosis in a cloning vector. koomesh. 2017; 19 (1) :183-190
URL: http://koomeshjournal.semums.ac.ir/article-1-3181-fa.html

یعقوبی عطیه، آریان احسان، درخشان محمد، مشکات زهرا. طراحی و ساخت کلونینگ وکتور حاوی قطعه فیوژنی دو ژن hspX و tb 10.4 مایکوباکتریوم توبرکلوزیس. كومش. 1395; 19 (1) :183-190

URL: http://koomeshjournal.semums.ac.ir/article-1-3181-fa.html



جلد 19، شماره 1 - ( زمستان 1395: جلد 19 شماره (1) 1395 ) برگشت به فهرست نسخه ها
کومش Koomesh
Persian site map - English site map - Created in 0.06 seconds with 32 queries by YEKTAWEB 4006